AAV（腺相关病毒，Adeno-Associated Virus）是一种常用于基因治疗和基因编辑研究的载体。为了确保AAV制剂的安全性和有效性，在制备过程中进行严格的质量控制（Quality Control, QC）是非常重要的。
下面是AAV常见的质量控制项目及其检测方法：
一、滴度检测（Titer Measurement）
1.基因组滴度（gDNA titer / vg titer）
表示病毒颗粒中携带的基因组数（viral genome, vg）。
常用方法：qPCR 或 ddPCR（数字PCR），以ITR或目标基因片段为检测区域。
2.感染滴度（Functional Titer）
表示AAV实际可以感染目标细胞并表达外源基因的能力。
方法：转导细胞后检测荧光/蛋白表达或qPCR检测转导后DNA。
3.总颗粒滴度（Total Capsid Titer）
表示所有病毒颗粒的总数（包括空壳）。
方法：ELISA法（使用抗AAV衣壳抗体）、TEM（透射电镜）。
二、纯度检测（Purity Assessment）
1.SDS-PAGE + 银染 / Coomassie染色
检测AAV衣壳蛋白（VP1/VP2/VP3）的比例，查看有无杂蛋白。
2.Western Blot
鉴定特异性蛋白，确认衣壳蛋白组成。
三、空/实比分析（Empty/Full Ratio）
判断有多少AAV是“空壳”（不含基因组），多少是“实壳”（含基因组）。
方法：
AUC（Analytical Ultracentrifugation）
TEM（透射电镜）
qPCR + ELISA结合法进行间接评估
四、内毒素检测（Endotoxin Test）
检测制剂中是否有细菌内毒素污染。
方法：LAL法（Limulus Amebocyte Lysate test）
五、宿主残留检测
宿主DNA残留（Host Cell DNA Residuals）
方法：qPCR，通常检测HEK293细胞来源的特定基因序列。
宿主蛋白残留（HCP, Host Cell Protein）
方法：ELISA，使用针对宿主细胞蛋白的抗体。
六、无菌检测（Sterility Test）
检查是否存在活细菌或真菌。
方法：标准培养法（USP <71>）
七、pH、渗透压、外观等理化性质检测
pH值是否稳定、渗透压是否合适、溶液是否澄清无可见颗粒。
质量标准依据：可参考FDA、EMA等对AAV制剂的相关要求
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