aav载体包装容量

一、AAV载体的最大包装容量

常规AAV的理论包装容量上限为 4.7 kb，包括所有必需元件（转基因、启动子、polyA、ITR等）。

AAV的ITR（Inverted Terminal Repeats）本身约占每侧145 bp，总共约290 bp。它们是病毒复制和包装必需的，因此必须包含在载体中。

实际上，用于插入外源基因的有效空间通常在4.5 kb左右，因为其他元素也要占空间（如启动子、polyA信号等）。

二、超载怎么办？

如果目标基因 + 元件总长超过AAV容量，有几种解决思路：

优化/压缩元件：使用小启动子（如hSyn、CMV-mini等）、优化polyA。

分段表达：Dual AAV 系统：将基因分两部分，用两个AAV分别携带，在细胞中通过重组或拼接恢复完整基因（如通过重叠区、重组系统、Inteins等）。

选择其他病毒系统：如果目标基因较大（如一些全长cDNA >5kb），可能需要使用慢病毒（8–10 kb）等替代。

三、超载的后果

若超过4.7 kb，会出现以下问题：

包装效率下降：病毒滴度显著降低（如从10¹² vg/mL降至10⁹ vg/mL）。

基因组截断：优先包装较小片段，导致外源基因不完整。

空衣壳比例升高：部分病毒颗粒不含完整基因组。