AAV过表达效果差的原因

AAV（腺相关病毒）过表达效果不佳可能由多种因素导致，主要包括以下几个方面：

1. 病毒滴度不足

低病毒滴度可能无法有效转导目标细胞，从而导致过表达效果不佳。

解决方案：提高病毒滴度，优化病毒生产和纯化工艺。

2. 细胞或组织类型不匹配

AAV具有血清型特异性，不同血清型对不同细胞和组织的转导效率不同。

解决方案：选择适合的AAV血清型（如AAV9适用于神经系统，AAV8适用于肝脏）。

3. 病毒进入细胞效率低

细胞表面的AAV受体表达水平可能影响病毒的进入。

解决方案：选择匹配的AAV血清型。

通过预处理（如胰酶消化、药物处理）提高受体表达。

4. 基因表达受到转录调控

选择的启动子可能在目标细胞中活性较低，导致表达不足。

解决方案：尝试不同的启动子（如CMV、CAG、hSyn等）。

5. 宿主免疫反应

机体可能对AAV产生免疫反应，清除病毒或抑制表达。

解决方案：选择更低免疫原性的AAV血清型

6. 病毒基因组整合或降解

AAV基因组可能在细胞中不稳定，导致表达持续时间短。

解决方案：使用稳定的病毒载体。

7. 目的基因本身的问题

过表达的基因可能对细胞有毒性，导致细胞死亡或抑制表达。

解决方案：降低基因表达水平（如使用弱启动子）

选择条件性或可诱导的表达系统。

8. 实验操作问题

细胞培养、病毒感染方式、病毒保存条件等因素可能影响AAV的转导效率。

解决方案：确保病毒储存于-80°C，避免冻融多次

采用合适的感染方法（如多次感染或高MOI）。