
AAV(腺相关病毒)包装服务是一种用于生产重组AAV载体的技术服务,主要用于基因治疗、基因功能研究和疾病模型构建。该服务通常包括以下几个关键步骤:
一、AAV包装流程
1.质粒制备:需要三个质粒:
重组AAV载体质粒(含目标基因)
包装质粒(AAV Rep/Cap)
辅助质粒(Helper plasmid,提供腺病毒辅助功能)
2.细胞转染:常用HEK293T细胞进行共转染,以便病毒复制和组装。
3.病毒收获:48-72小时后,收集细胞和培养液,通过裂解细胞释放病毒。
4.纯化:常用超速离心、柱层析或PEG沉淀等方法纯化AAV病毒颗粒。
5.病毒滴度检测:采用qPCR、ELISA或荧光定量方法测定病毒滴度(GC/ml)。
6.质量控制:通过电子显微镜或Western blot确认病毒颗粒完整性。
二、AAV包装服务的常见类型
不同血清型AAV(AAV1~AAV9,AAV-DJ等):适用于不同的组织靶向性。
定制载体构建:可以提供启动子、荧光蛋白等定制化服务。
高滴度病毒制备:适用于体内实验。
CRISPR/AAV系统:用于基因编辑研究。
三、选择AAV包装服务的要点
血清型选择(根据组织特异性,如AAV9适用于神经系统)
滴度需求(高滴度适用于体内实验,低滴度适用于细胞实验)
纯化方式(如超速离心或柱层析)
质量控制标准(如无内毒素、无宿主DNA残留等)
派真生物长期专注于质粒与AAV服务,在质粒克隆、质粒抽提与AAV包装等项目有着丰富的经验, 可提供多种血清型AAV,以满足您的各种实验需求。我们通过创新的AAV包装工艺,确保为您提供高纯度(95%以上)、高滴度(1E+13 GC/mL以上)的AAV,内毒素符合最高标准要求(<10E U/mL)。
派真生物也提供符合GMP规范的AAV生产、加工、批检验、IND药学研究资料撰写等服务,从上游AAV生产到下游分离纯化工艺均具有自主知识产权,满足IIT试验、IND申报和临床试验程序法规要求。
关于派真
作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IIT、IND及BLA的各个阶段。
凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。
