慢病毒感染中的对照病毒的使用

2 月 11 , 2025
分享:

在慢病毒感染实验中,对照病毒的使用具有重要意义,主要用于评估实验病毒的感染效率、验证实验结果的特异性以及确定实验操作的可靠性。以下是对照病毒在慢病毒感染中的具体使用方法和作用:

1. 对照病毒的类型

阴性对照慢病毒:通常不携带目标基因或特定序列,用于观察无特定基因干预时细胞的状态。

空载体对照慢病毒:仅携带基本的载体骨架,但不包含目标基因或报告基因,用于评估载体本身对细胞的影响。

报告基因对照慢病毒:如携带绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(RFP)的慢病毒,用于评估感染效率和细胞转导效果。

2. 对照病毒的作用

评估感染效率:通过设置不同MOI(感染复数)的实验组和对照组,观察荧光表达情况或通过qPCR检测目的基因表达,确定最佳感染条件。

验证实验特异性:确保实验组中观察到的生物学效应是由目标基因引起的,而不是其他因素导致的。

确定筛选药物浓度:在使用带有抗性基因的慢病毒进行筛选时,对照组可以帮助确定筛选药物(如嘌呤霉素)的最适浓度。

3. 对照病毒的使用方法

实验设计:在实验中设置对照组和实验组。对照组使用对照病毒,实验组使用携带目标基因的慢病毒。

感染条件优化:通过预实验确定最佳MOI,同时设置空白对照组以评估细胞状态。

结果分析:比较实验组和对照组的基因表达水平、细胞功能变化等,以验证实验结果的可靠性和特异性。

4. 注意事项

病毒滴度:确保对照病毒和实验病毒的滴度一致,以保证实验条件的可比性。

细胞状态:在实验前确保细胞状态良好,避免因细胞状态差异影响实验结果。

避免反复冻融:对照病毒和实验病毒应避免反复冻融,以保持病毒的活性。

对照病毒在慢病毒感染实验中是不可或缺的工具,它为实验提供了重要的对照和参考,有助于准确评估实验效果和验证实验结果的可靠性。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

下载