在实验室中，保存和分装腺相关病毒（AAV）需要遵循特定的步骤和注意事项，以确保病毒颗粒的活性和稳定性。以下是常规的AAV保存与分装方法：
1. 保存条件
温度选择：
短期保存（1-2周）： 建议保存在 4°C。
长期保存（数月到数年）： -80°C是最佳选择，可显著减少病毒颗粒活性的损失。
避免反复冻融：
反复冻融会导致病毒活性显著降低。分装为小体积（如10 μL或50 μL）可避免重复冻融。
2. 缓冲液选择
避免使用含高浓度盐或不稳定组分的缓冲液，防止对病毒颗粒的结构造成影响。
3. 分装步骤
1.准备工作：
使用无菌耗材（如无菌EP管、移液枪头等），并在超净工作台内操作以减少污染风险。
预先标记每个分装管，标注病毒类型、滴度、日期等信息。
2.分装过程：
根据实验需要，将AAV原液分装成小体积（如10 μL、20 μL）。
每次移液时，轻柔操作，避免产生气泡，防止病毒颗粒破损。
3.密封保存：
确保分装管盖子紧密闭合，必要时可以用封口膜包裹以防止脱盖。
保存于适宜温度（-80°C）下。
4. 使用注意事项
解冻方式： 使用前可在冰上缓慢解冻，避免在37°C快速解冻，以减少病毒颗粒失活。
稀释处理： 若需稀释病毒，建议使用与保存缓冲液相同的稀释液，并现配现用。
操作安全： AAV被认为是低风险病毒载体，但在实验操作中仍需佩戴个人防护设备（如手套、口罩）并符合生物安全规范。
5. 稳定性检查
定期对保存的AAV进行滴度检测，以确保病毒活性，特别是在使用保存较久的分装样品时。
这些方法可确保AAV在保存和使用过程中的高效性与稳定性。如有其他特定要求或病毒类型，也需调整保存方式。
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