是的,我们可以将基因编辑用的 mRNA 和 sgRNA 一同包封在 LNP 中。我们已成功将 SpCas9 mRNA 与 sgRNA 共同包封,并在 Huh7 细胞中实现了显著的基因编辑效率。我们推荐使用 LP01 配方,并将在测试其他配方后持续更新相关信息。
我们使用线性化的质粒 DNA 作为 mRNA 生产的模板。基因序列可以由我们团队通过派真生物的专有载体和设计工具进行构建,也可以由您自行提供。一旦序列设计确认无误,我们将负责整个基因合成及 mRNA 制备流程,并按照服务协议交付最终的 mRNA 产品。
是的,我们可通过与 Kudo Biotechnology 的合作提供 cGMP 级别的 mRNA。如需了解更多信息,欢迎访问我们的 GMP mRNA 服务页面。请查阅我们的 GMP mRNA 页面获取详细内容。
所需的 mRNA 剂量取决于目标表达水平以及靶向的细胞或组织类型。在小鼠注射实验中,我们曾使用每千克体重 0.5 mg 的 FLuc 或 EGFP mRNA(以 LNP 包封形式),可获得较强的表达效果。对于具体目标基因,建议尝试多个剂量进行优化,以确定最佳使用量。
通常情况下,我们建议在 6 孔板中每孔使用 0.5 µg 至 2.5 µg 的 mRNA(每孔约含 2 mL 培养基和 1.0–3.5 × 10⁶ 个细胞)。在 24 孔板中转染时,每孔一般使用 0.5 µg 至 1 µg 的 mRNA。
是的,我们可以对客户提供的 mRNA 进行质量检测。请参考我们提供的 mRNA 质量控制(QC)检测项目,详见此页面。
为了检测 poly(A) 尾的长度,我们会使用 RNase 或其他水解试剂对 mRNA 样本进行酶解处理,将其降解为较小的片段,并释放出富含腺苷的 poly(A) 尾序列。随后,通过液相色谱-质谱联用(LC-MS)对这些片段进行定量分析。
可以,我们可以将您之前订单中的 ORF 序列亚克隆至我们专有的 mRNA 载体中,该载体包含 T7 启动子、UTR 以及 110 个腺苷酸的 poly(A) 尾,用于后续的 mRNA 生产。