
慢病毒包装(lentivirus packaging)是指利用慢病毒(Lentivirus)作为载体,将外源基因(如治疗性基因、报告基因或特定的RNA干扰序列)插入到慢病毒载体中,并通过细胞培养技术在体外产生具有感染能力的慢病毒颗粒的过程。这些病毒颗粒随后可以用于感染目标细胞,将外源基因传递到宿主细胞中,实现基因的稳定表达或基因沉默。
慢病毒包装质粒是用于构建和包装慢病毒载体的质粒组合。慢病毒载体系统通常需要三种主要类型的质粒来实现有效的病毒包装和转导能力:
1.载体质粒(Transfer Plasmid):这是含有目标基因的质粒,通常是带有外源基因和必要的启动子序列,如CMV启动子、EF1α等。质粒上的包装信号(ψ序列)确保外源基因能够被包装到病毒颗粒中。
2.包装质粒(Packaging Plasmid):这是提供病毒核心蛋白的质粒,通常包括gag、pol基因,它们编码病毒的核心结构蛋白和逆转录酶。这类质粒通常使用缺陷型HIV-1病毒的核心基因,确保慢病毒具有感染能力,但无法在宿主细胞中复制。
3.包膜质粒(Envelope Plasmid):这是提供病毒包膜蛋白的质粒。最常用的是VSV-G质粒(通常编码水疱性口炎病毒糖蛋白),其能赋予病毒较广的宿主范围。VSV-G包膜蛋白可以增强病毒的稳定性,使其适合感染多种类型的细胞。
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