如何规范使用AAV病毒产品

1 月 20 , 2025
分享:

规范使用AAV病毒产品需要从实验室安全、操作规范、保存条件、废弃物处理等方面入手,以下是具体建议:

实验室安全与操作规范

1.操作环境

AAV病毒操作应在BSL-2级别的生物安全柜中进行。如果使用普通超净工作台,需关闭排风机,避免病毒与外界环境接触。

操作时需穿戴实验服、口罩、护目镜和一次性手套。

2.操作过程

操作时要小心,避免病毒飞溅或产生气溶胶。若污染台面,需立即用70%乙醇或1%SDS溶液擦拭。

使用密封性良好的离心管进行离心操作,离心后在生物安全柜内打开。

使用显微镜观察细胞感染情况时,需先拧紧培养瓶或盖紧培养板,用70%乙醇擦拭外壁。

3.废弃物处理

接触过病毒的枪头、离心管、培养板等需用84消毒液(1:20)浸泡24小时或高压湿热灭菌处理后丢弃。

病毒保存与稀释

1.保存条件

AAV病毒可在-80℃保存12个月,4℃保存不超过3天。

避免反复冻融,以免影响病毒滴度。

2.稀释方法

病毒使用前需冰浴融化,并在冰上操作。

可使用Tris缓冲液、无菌PBS进行稀释。

实验设计与应用

1.感染细胞

根据细胞类型和实验需求选择合适的MOI(感染复数)。

感染前需确保细胞状态良好,感染后需在适当条件下孵育。

2.体内应用

注射时需注意注射部位和剂量,避免病毒泄漏。

对于携带致病基因或有害因子的AAV载体,需在更高级别的生物安全实验室操作。

安全培训与法规遵循

1.操作人员需经过生物安全培训,获得合格证书后方可进行实验。

2.实验过程中需严格遵守相关法规和实验室管理要求。

规范使用AAV病毒产品需从实验室安全、操作规范、保存条件、废弃物处理等方面入手,确保实验安全和数据可靠性。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

下载