AAV包装好之后,需要什么样的运输和保存条件?

2025年2月12日
分享:

AAV(腺相关病毒)包装后的运输和保存条件需严格遵循特定规范,以确保病毒活性和稳定性。以下是综合多个来源的详细指导:

一、保存条件

1.温度选择

短期保存(1-3天):推荐4°C冷藏保存,需避免频繁温度波动。

长期保存(数月到数年):最佳温度为-80°C超低温冷冻,可显著减少病毒活性损失。对于极长期存储(如超过6个月),液氮罐(-196°C)是更优选择。

2.分装要求

需将AAV原液分装为小体积(如10 μL、25 μL或50 μL),以减少反复冻融导致的滴度下降(每次冻融可能导致活性损失10%-50%)。

分装时需使用无菌耗材,并在超净工作台内操作以避免污染。

3.缓冲液与保护剂

避免使用含高浓度盐或不稳定成分的缓冲液,以免破坏病毒结构。

若需常温短暂保存,可添加保护剂(如甘油或蔗糖)以延缓降解,但仍建议尽快转入低温环境。

4.稳定性监测

定期检测病毒滴度和活性,尤其是保存超过6个月的样品。

二、运输条件

1.低温运输

运输过程中需维持低温环境,推荐使用干冰(-80°C)或冰袋(4°C)保存。对于超低温运输,可采用液氮罐或专业冷藏箱。

运输容器需密封良好,防止温度波动或泄漏,例如使用封口膜密封离心管。

2.避光与防震

避免光照和剧烈震动,以减少病毒颗粒的物理损伤。

3.运输时效性

常温运输仅适用于极短时间(数小时内),且需提前评估病毒活性损失风险。

三、其他注意事项

解冻方法:使用前在冰浴中缓慢融化,避免37°C快速解冻或反复冻融。

稀释处理:若需稀释病毒,需使用与保存缓冲液相同的稀释液(如无菌PBS或生理盐水),并现配现用。

生物安全:操作时需佩戴防护设备(手套、口罩),废弃物需高温灭菌处理。

通过上述措施,可最大限度维持AAV的感染效率和实验结果的可靠性。具体操作需结合病毒类型、实验需求和供应商建议进行优化。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

下载