
AAV(腺相关病毒)包装后的运输和保存条件需严格遵循特定规范,以确保病毒活性和稳定性。以下是综合多个来源的详细指导:
一、保存条件
1.温度选择
短期保存(1-3天):推荐4°C冷藏保存,需避免频繁温度波动。
长期保存(数月到数年):最佳温度为-80°C超低温冷冻,可显著减少病毒活性损失。对于极长期存储(如超过6个月),液氮罐(-196°C)是更优选择。
2.分装要求
需将AAV原液分装为小体积(如10 μL、25 μL或50 μL),以减少反复冻融导致的滴度下降(每次冻融可能导致活性损失10%-50%)。
分装时需使用无菌耗材,并在超净工作台内操作以避免污染。
3.缓冲液与保护剂
避免使用含高浓度盐或不稳定成分的缓冲液,以免破坏病毒结构。
若需常温短暂保存,可添加保护剂(如甘油或蔗糖)以延缓降解,但仍建议尽快转入低温环境。
4.稳定性监测
定期检测病毒滴度和活性,尤其是保存超过6个月的样品。
二、运输条件
1.低温运输
运输过程中需维持低温环境,推荐使用干冰(-80°C)或冰袋(4°C)保存。对于超低温运输,可采用液氮罐或专业冷藏箱。
运输容器需密封良好,防止温度波动或泄漏,例如使用封口膜密封离心管。
2.避光与防震
避免光照和剧烈震动,以减少病毒颗粒的物理损伤。
3.运输时效性
常温运输仅适用于极短时间(数小时内),且需提前评估病毒活性损失风险。
三、其他注意事项
解冻方法:使用前在冰浴中缓慢融化,避免37°C快速解冻或反复冻融。
稀释处理:若需稀释病毒,需使用与保存缓冲液相同的稀释液(如无菌PBS或生理盐水),并现配现用。
生物安全:操作时需佩戴防护设备(手套、口罩),废弃物需高温灭菌处理。
通过上述措施,可最大限度维持AAV的感染效率和实验结果的可靠性。具体操作需结合病毒类型、实验需求和供应商建议进行优化。
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