派真小课堂丨一文掌握AAV动物实验基本要点与策略

2023年4月17日
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AAV(Adeno-Asso动物实验最重要的意义在于研究者可通过对动物体内功能研究,获得相对可靠的药效或治疗实验数据,探索疾病的发生发展机制,为之后开展正式药效学、安全性评价和人体临床研究提供关键支持。特别是在临床前研发中,动物实验甚至贯穿整个药物研发流程,如药物靶点的识别、药物的筛选、给药优化、药物代谢和药代动力学、安全性评价等周期,都需要从动物实验获取数据,评估药物有效性和安全性。实验动物科学在药物临床前研发的作用就越发重要,它可以减少动物使用过程中差异性,提高实验结果以及重复性,主要涉及到以下这几方面的内容。

01 选取实验动物

动物实验设计首先要考虑如何选择合适的实验动物,以确保达到预期实验目的。选择疾病实验动物要遵循“相似性原则”、“特异性原则”、“标准化原则”、“适宜规格原则”、“经济易获性原则”等。

相似性原则是要求选择实验动物时尽量选择与人体结构、功能、代谢及疾病特征相似的动物;

特异性原则是要求尽量选取解剖、生理特点符合实验目的的动物;

标准化原则是指实验动物遗传背景明确,模型性状显著且稳定;

适宜规格原则是指根据实验目的选择实验动物,需考虑实验动物的年龄、体重、性别、生理状况以及品种品系。

除此之外,尽量选择结构简单又能反映研究指标、经济容易获得的实验动物。

 

02 实验动物前准备

 

在 整 个 实 验 过 程 中 要 严 格 遵 循 “3R”原 则 , 即替代(Replacement)、减少(Reduction)、优化 (Refifinement)。3R原则是一种让研究者科学合理的利用实验动物的方法,目的是在不影响实验要求和结果的基础上,尽量减少实验动物的痛苦。在实验开始前,完善实验设计,选取合适实验室,准备实验动物饲料、饮水、垫料等,购买合适的实验动物开展实验。

 

03 实验动物编号

 

实验动物编号方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素选择合适的标记方法。目前比较常见的编号方法有挂牌法、打号法、针刺法、染色法、打耳孔法、耳标法、电子芯片法、纹身法等。

 

04 实验动物分组原则

 

动物分组要遵循“随机分配”原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组和对照组中,避免出现误差,影响实验结果。随机分配一般有配对比较法随机分组、随机区组法随机分配以及完全随机分组这几种方法。

 

实验动物分组一般有对照组和实验组之分,这里介绍一下常用的对照组。

常用对照组

自身对照组:实验动物在实验处理前、后阶段的实验数据就分别是对照组和实验组的实验结果,设置自身对照组是为了排除个体差异。

平行对照组:可以是阳性对照组、阴性对照组、空白对照组。

阳性对照组:是指实验动物采用已知有效的实验手段或药物;

阴性对照组:是指与实验组采用同样的方法处理,但不采用实验所需的药物或实验手段;

空白对照组:是指不采用任何处理。

 

05 实验动物数量

 

每组的实验动物数量也会影响整个实验结果,选取合适的每组动物数量会取得比较好的实验数据。这里列举几种常见实验动物的选取建议,小型动物经济易获得,在选择此类实验动物时,每组动物数量可以稍微多一些;大型动物一般不易获取,价格也更为昂贵,动物数量要保持最低要求。每组的实验动物数量要根据实验周期长短、类型以及统计学要求而定,如果是慢性实验或定期处死动物的实验,准备足够的动物数量弥补死亡后的动物数,保持足够的样本量。

动物选择

啮齿类动物:比如小鼠、大鼠,建议按每组8~10只,越多越好。

大型动物:比如猴子、猪、狗等,建议每组至少5只。

总之,选择动物时应尽可能选用与人在生物学上接近,在机体解剖、生理功能相类似的动物,应选用敏感动物品系,选用靶器官高效应实验动物。同时,注意动物的年龄、性别、遗传、营养、环境等因素。对于不同种属动物的采血方式和采血量,在最大程度保护动物权益的前提下,基于相应的基本原则,大家可以自行选择与调整。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

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